在利用克隆技術(shù)生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物過(guò)程中,遺傳霉素(Geneticin,G418)是最常用于細(xì)胞篩選的藥物之一。G418是一種氨基糖苷類抗生素,具有抑制細(xì)胞增殖、誘發(fā)細(xì)胞凋亡等作用并對(duì)原核和真核細(xì)胞等都有毒性。雖然有研究顯示,G418篩選對(duì)轉(zhuǎn)基因細(xì)胞核移植胚胎的發(fā)育效率有負(fù)面作用,但Liu等統(tǒng)計(jì)分析了全世界至今已發(fā)表的克隆豬生產(chǎn)數(shù)據(jù),比較了轉(zhuǎn)基因和非轉(zhuǎn)基因克隆胚胎的發(fā)育效率,發(fā)現(xiàn)2組之間胚胎的發(fā)育效率不存在顯著差異。此外,研究發(fā)現(xiàn),利用G418篩選的轉(zhuǎn)基因細(xì)胞作為核供體生產(chǎn)的克隆胚胎,其胚胎的發(fā)育效率顯著高于未經(jīng)G418處理的非轉(zhuǎn)基因組。雖然上述研究所用的轉(zhuǎn)基因細(xì)胞都是經(jīng)過(guò)G418藥物篩選處理,但它們同時(shí)還攜帶整合的外源基因,這導(dǎo)致其結(jié)果難以準(zhǔn)確證明G418篩選供體細(xì)胞對(duì)轉(zhuǎn)基因克隆胚胎發(fā)育效率的影響。
氣相液氮罐